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特殊檢測服務 >>> FISH檢測服務
 

技術名稱
熒光標記的原位雜交技術FISH技術平臺(詳情請見病理檢測服務分子病理學部分介紹)

技術原理
FISH (fluorescence in situ hybridization)技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的,二者經變性-退火-復性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素、地高辛,可利用該報告分子與熒光素標記的特異親和素之間的免疫化學反應,經熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進行定性、定量或相對定位分析。

技術特點
原位雜交的探針按標記分子類型分為放射性標記和非放射性標記。用同位素標記的放射性探針優勢在于對制備樣品的要求不高,可以通過延長曝光時間加強信號強度,故較靈敏。缺點是探針不穩定、自顯影時間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。采用熒光標記系統則可克服這些不足,這就是FISH技術。FISH技術作為非放射性檢測體系,具有以下優點:(1)熒光試劑和探針經濟、安全;(2)探針穩定,一次標記后可在兩年內使用;(3)實驗周期短、能迅速得到結果、特異性好、定位準確;(4)FISH可定位長度在1kb的DNA序列,其靈敏度與放射性探針相當;(5)多色FISH通過在同一個核中顯示不同的顏色可同時檢測多種序列;(6)既可以在玻片上顯示中期染色體數量或結構的變化,也可以在懸液中顯示間期染色體DNA的結構。

服務內容
FISH技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。
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